Изучение дегрануляции тучных клеток при анафилаксии у белых крыс лабораторная работа
Уважаемые коллеги!
Мы рады приветствовать Вас на сайте Всероссийского журнала «Наука молодых (Eruditio Juvenium)», который издается Рязанским государственным медицинским университетом имени академика И.П. Павлова. В журнале публикуются оригинальные научные статьи молодых ученых по проблемам теоретической и прикладной медицины, медицинской биологии и психологии, педагогике и методологии медицинского образования.
Результаты научно-исследовательской и научно-методической деятельности преподавателей, докторантов, соискателей, аспирантов и студентов могут быть представлены не только в виде научных статей, но и заметок из клинической практики, нормативных документов, сведений о перспективных изобретениях и рационализаторских предложениях, материалов по истории клиник и лечебных учреждений. Редколлегия журнала принимает статьи от ученых из любых регионов России, а также ближнего и дальнего зарубежья. Это позволяет отбирать из представляемых в журнал работ действительно лучшие.
Все статьи подлежат обязательному рецензированию. Надеемся, что наш журнал предоставит широкие возможности для публичного выступления и обсуждения результатов работ молодых ученых, будет способствовать интеграции и координации их деятельности, содействовать повышению научного и профессионального уровня.
Приглашаем авторов к активному наполнению редакционного «портфеля».
Главный редактор журнала, д.м.н., профессор Р.Е. Калинин
«Наука молодых (Eruditio Juvenium)» рецензируемый научно-практический медицинский журнал
(ISSN 2311-3820).
- Выходит 4 раза в год.
- Основан в 2013 году.
Учредитель: федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Рязанский государственный медицинский университет имени академика И.П. Павлова» Министерства здравоохранения Российской Федерации
Свидетельство о регистрации средства массовой информации ПИ №ФС77-69031 от 07 марта 2017.
Подписной индекс – 70110
Включен в перечень рецензируемых научных изданий, в которых должны быть опубликованы основные научные результаты диссертаций на соискание ученой степени кандидата наук, на соискание ученой степени доктора наук (№2124 от 06.06.2017).
Журнал индексируется в следующих базах данных и информационно-справочных изданиях:
Источник
АНАФИЛАКСИЯ У КРЫС И МЫШЕЙ
Многочисленные попытки воспроизведения активной сенсибилизации у мышей в прежние годы давали в общем нечеткие результаты, на основании которых создалось мнение об относительно низкой чувствительности мышей к анафилактизации и о плохой воспроизводимости у них анафилактического шока (Н.
свойств организма мыши (адреналэктомия и пр.), а на изменения физико-химических свойств и состояния сенсибилизирующего антигена.
собность сывороток сенсибилизированных животных передавать состояние анафилаксии пассивно.
В нашей лаборатории подтверждена возможность получения анафилаксии у белых крыс при условии сенсибилизации их нормальной бычьей или лошадиной сывороткой в смеси со стерильным вазелиновым маслом. На 14—17-й день после последней сенсибилизирующей инъекции производили разрешающую инъекцию соответствующей сыворотки в бедренную вену в объеме 1—3 мл.
У 11 из 19 взятых в опыт животных возник анафилактический шок различной тяжести. У 8 крыс шока не возникло (табл. 78).
| Таблица 78 |
Апафилактический шок у здоровых крыс
| Число | Масса, г | Результаты | |||
| животных | без симптомов | слабый шок | тяжелый шок | смертельный шок | |
| 19 | 105—207 | 8 | 7 | 2 | 2 |
Характеристика шока в наших опытах была следующей:
1. Слабый шок. После разрешающей инъекции у животных появляются беспокойство, вялость, легкая одышка. Эти симптомы проходят через 20—30 мин после введения разрешающей дозы.
2. Тяжелый шок. Кроме указанных выше симптомов, у животных появляются сильная одышка, судороги; животное падает на бок. Симптомы проходят через 1—2 ч после разрешающей инъекции.
3. Смертельный шок. Шок со смертельным исходом в течение суток после разрешающей инъекции.
Результаты опыта показывают, что сенсибилизация крыс сывороткой в смеси с вазелиновым маслом дает возможность воспроизвести анафилактический шок у белых крыс более чем в половине случаев.
Для более объективной характеристики этого вопроса мы титровали ЛДбо по способу Рида и Менча по отношению к лошадиной сыворотке у различных групп крыс. vspace=0 align=center>
ЛДбо к пормальной лошадиной сыворотке у крыс
| Число живот- | ЛДза В 1 МЛ | |
| Опытная группа | пых в группе | |
| Здоровые несенсибилизированиые Сенсибилизированные лошадиной сывороткой | 16 14,37 | |
| Сенсибилизированные лошадиной сывороткой с вазе- | 16 | 4,941 |
| лиловым маслом | ||
| Сеисибилизироваииые, получившие за 6 ч до разрешающей инъекции яичный белок в дозе 0,3 мл на 100 г | 12 | 14,37 |
Результаты опытов представлены в табл.
Известно, что яичный белок является сильным либератором гистамина у белых крыс (Paton, 1958). Нас интересовало, влияет ли предварительное введение яичного белка до разрешающей инъекции сыворотки на анафилактический шок у белых крыс. Для решения этого вопроса крысам, сенсибилизированным лошадиной сывороткой с вазелиновым маслом, на 14-й день после сенсибилизирующей инъекции и за 6 ч до опыта введен внутривенно яичный белок из расчета 0,3 мл на 100 г массы.
 Рис. 49. Анафилактический итак у крыс. і — дыхательные движения; 2 — артериальное давление; 3 — отметка времени 3 с; 4 — отметка введения нормальной лошадиной сыворотки. |
Как видно из табл. 79, наименьшая величина ЛДбо получается у крыс, сенсибилизированных с вазелиновым маслом как проводником.
Освобождение гистамина и серотонина либератором — яичным белком, вызванное до разрешающего введения аллергена — лошадиной сыворотки, резко снижает сенсибилизацию животных, ослабляет их реакцию на сыворотку и повышает ЛДбо-
Нами поставлены острые опыты для анализа изменений кровяного давления и дыхания при анафилактическом шоке.
Артериальное давление сразу после разрешающего введения сыворотки, так же как и у несенсибилизированных крыс, всегда повышается в пределах от 10 до 64 мм рт. ст. в разных опытах (в среднем 32,5 мм рт. ст.), а потом падает обычно до исходного уровня. Дыхательные движения обычно не претерпевают резких изменений (рис. 49). Наблюдается лишь некоторое учащение дыхания. Однако при смертельном шоке дыхание затрудняется, потом останавливается.
Возникает вопрос, какую роль играет вазелиновое масло в сенсибилизации организма к сывороточным белкам и как это отражается на ходе выработки антител к белкам лошадиной сыворотки.
Для решения этого вопроса мы специально обратили внимание на динамику образования антител-препицитинов в организме животных, сенсибилизированных нормальной лошадиной сывороткой в смеси с маслом или
без него, но не наблюдали особой разницы между титрами антител в крови этих групп животных.
Таким образом, нами установлено следующее:
1. При сенсибилизации крыс лошадиной сывороткой в смеси с вазелиновым маслом у них можно воспроизвести анафилактический шок; сенсибилизация крыс сывороткой без вазелинового масла не меняет их устойчивости к анафилаксии.
2. Большое количество нормальной лошадиной сыворотки (10— 15 мл/100 г) при первичном внутривенном введении оказывает на крыс токсическое воздействие вплоть до смертельного исхода.
3. Предварительное введение малой дозы яичного белка (0,3 мл/100 г) предохраняет крыс от шока.
4. Артериальное давление крыс при анафилактическом шоке характеризуется двумя фазами: сразу после разрешающей инъекции повышается, потом постепенно падает до исходного уровня. IIIois иногда заканчивается смертью.
Участие тучных клеток в анафилаксии у крыс и мышей несколько отличается от такового у морских свинок. Повреждение и дегрануляции тучных клеток, а также выделение из них гистамина наблюдаются у этих животных только в опытах с актирной анафилаксией, например при анафилактическом шоке.
Попытки вызвать дегрануляцию тучных клеток крыс вне организма путем их пассивной сенсибилизации (обработка тучных клеток из брюшной полости крыс сывороткой крыс, сенсибилизированных к какому-либо аллергену) не увенчались успехом. Высказывается предположение, что сенсибилизация тучных клеток крыс или мышей при активной анафилаксии вызывается фиксацией на них особых «цитофилышх» антител, отличных от преципитинов. Цитофилыхые антитела, в отличие от преципитинов, не циркулируют в крови активно сенсибилизированных крыс, поэтому сыворотка крови последних не сенсибилизирует тучные клетки в опытах пассивной анафилаксии (I.
18 Общая аллергология
Г л а в а VII АЛЛЕРГИЧЕСКИЕ РЕАКЦИИ КЛЕТОК
В настоящее время накоплен значительный экспериментальный материал, показывающий различные изменения структуры и функции клеток сенсибилизированных животных под влиянием воздействия на них специфического аллергена. Работы, выполненные в этом плане, представлены исследованиями, в которых специфический аллерген в виде «разрешающего» воздействия поражал изолированные клетки крови (эритроциты, лейкоциты, кровяные пластинки), клетки тканевых культур, или, наконец, клетки изолированных органов (гладкомышечные органы, нервные узлы). К этой же группе исследований примыкают работы, в которых изучались изменения функций клеток отдельных органов и тканей в целом организме. Это — большая группа работ по изучению аллергических реакций различных органов (печени, почек, желудочно-кишечного* тракта), покровного эпителия кожи, слизистых оболочек или клеточных элементов мезенхимального происхождения. Обзор этих работ см. у А. Д. Адо (1970).
Источник
АНАФИЛАКСИЯ У КРЫС И МЫШЕЙ
Многочисленные попытки воспроизведения активной сенсибилизации у мышей в прежние годы давали в общем нечеткие результаты, на основании которых создалось мнение об относительно низкой чувствительности мышей к анафилактизации и о плохой воспроизводимости у них анафилактического шока (Н.
свойств организма мыши (адреналэктомия и пр.), а на изменения физико-химических свойств и состояния сенсибилизирующего антигена.
собность сывороток сенсибилизированных животных передавать состояние анафилаксии пассивно.
В нашей лаборатории подтверждена возможность получения анафилаксии у белых крыс при условии сенсибилизации их нормальной бычьей или лошадиной сывороткой в смеси со стерильным вазелиновым маслом. На 14—17-й день после последней сенсибилизирующей инъекции производили разрешающую инъекцию соответствующей сыворотки в бедренную вену в объеме 1—3 мл.
У 11 из 19 взятых в опыт животных возник анафилактический шок различной тяжести. У 8 крыс шока не возникло (табл. 78).
| Таблица 78 |
Апафилактический шок у здоровых крыс
| Число | Масса, г | Результаты | |||
| животных | без симптомов | слабый шок | тяжелый шок | смертельный шок | |
| 19 | 105—207 | 8 | 7 | 2 | 2 |
Характеристика шока в наших опытах была следующей:
1. Слабый шок. После разрешающей инъекции у животных появляются беспокойство, вялость, легкая одышка. Эти симптомы проходят через 20—30 мин после введения разрешающей дозы.
2. Тяжелый шок. Кроме указанных выше симптомов, у животных появляются сильная одышка, судороги; животное падает на бок. Симптомы проходят через 1—2 ч после разрешающей инъекции.
3. Смертельный шок. Шок со смертельным исходом в течение суток после разрешающей инъекции.
Результаты опыта показывают, что сенсибилизация крыс сывороткой в смеси с вазелиновым маслом дает возможность воспроизвести анафилактический шок у белых крыс более чем в половине случаев.
Для более объективной характеристики этого вопроса мы титровали ЛДбо по способу Рида и Менча по отношению к лошадиной сыворотке у различных групп крыс. vspace=0 align=center>
ЛДбо к пормальной лошадиной сыворотке у крыс
| Число живот- | ЛДза В 1 МЛ | |
| Опытная группа | пых в группе | |
| Здоровые несенсибилизированиые Сенсибилизированные лошадиной сывороткой | 16 14,37 | |
| Сенсибилизированные лошадиной сывороткой с вазе- | 16 | 4,941 |
| лиловым маслом | ||
| Сеисибилизироваииые, получившие за 6 ч до разрешающей инъекции яичный белок в дозе 0,3 мл на 100 г | 12 | 14,37 |
Результаты опытов представлены в табл.
Известно, что яичный белок является сильным либератором гистамина у белых крыс (Paton, 1958). Нас интересовало, влияет ли предварительное введение яичного белка до разрешающей инъекции сыворотки на анафилактический шок у белых крыс. Для решения этого вопроса крысам, сенсибилизированным лошадиной сывороткой с вазелиновым маслом, на 14-й день после сенсибилизирующей инъекции и за 6 ч до опыта введен внутривенно яичный белок из расчета 0,3 мл на 100 г массы.
| Рис. 49. Анафилактический итак у крыс. і — дыхательные движения; 2 — артериальное давление; 3 — отметка времени 3 с; 4 — отметка введения нормальной лошадиной сыворотки. |
Как видно из табл. 79, наименьшая величина ЛДбо получается у крыс, сенсибилизированных с вазелиновым маслом как проводником.
Освобождение гистамина и серотонина либератором — яичным белком, вызванное до разрешающего введения аллергена — лошадиной сыворотки, резко снижает сенсибилизацию животных, ослабляет их реакцию на сыворотку и повышает ЛДбо-
Нами поставлены острые опыты для анализа изменений кровяного давления и дыхания при анафилактическом шоке.
Артериальное давление сразу после разрешающего введения сыворотки, так же как и у несенсибилизированных крыс, всегда повышается в пределах от 10 до 64 мм рт. ст. в разных опытах (в среднем 32,5 мм рт. ст.), а потом падает обычно до исходного уровня. Дыхательные движения обычно не претерпевают резких изменений (рис. 49). Наблюдается лишь некоторое учащение дыхания. Однако при смертельном шоке дыхание затрудняется, потом останавливается.
Возникает вопрос, какую роль играет вазелиновое масло в сенсибилизации организма к сывороточным белкам и как это отражается на ходе выработки антител к белкам лошадиной сыворотки.
Для решения этого вопроса мы специально обратили внимание на динамику образования антител-препицитинов в организме животных, сенсибилизированных нормальной лошадиной сывороткой в смеси с маслом или
без него, но не наблюдали особой разницы между титрами антител в крови этих групп животных.
Таким образом, нами установлено следующее:
1. При сенсибилизации крыс лошадиной сывороткой в смеси с вазелиновым маслом у них можно воспроизвести анафилактический шок; сенсибилизация крыс сывороткой без вазелинового масла не меняет их устойчивости к анафилаксии.
2. Большое количество нормальной лошадиной сыворотки (10— 15 мл/100 г) при первичном внутривенном введении оказывает на крыс токсическое воздействие вплоть до смертельного исхода.
3. Предварительное введение малой дозы яичного белка (0,3 мл/100 г) предохраняет крыс от шока.
4. Артериальное давление крыс при анафилактическом шоке характеризуется двумя фазами: сразу после разрешающей инъекции повышается, потом постепенно падает до исходного уровня. IIIois иногда заканчивается смертью.
Участие тучных клеток в анафилаксии у крыс и мышей несколько отличается от такового у морских свинок. Повреждение и дегрануляции тучных клеток, а также выделение из них гистамина наблюдаются у этих животных только в опытах с актирной анафилаксией, например при анафилактическом шоке.
Попытки вызвать дегрануляцию тучных клеток крыс вне организма путем их пассивной сенсибилизации (обработка тучных клеток из брюшной полости крыс сывороткой крыс, сенсибилизированных к какому-либо аллергену) не увенчались успехом. Высказывается предположение, что сенсибилизация тучных клеток крыс или мышей при активной анафилаксии вызывается фиксацией на них особых «цитофилышх» антител, отличных от преципитинов. Цитофилыхые антитела, в отличие от преципитинов, не циркулируют в крови активно сенсибилизированных крыс, поэтому сыворотка крови последних не сенсибилизирует тучные клетки в опытах пассивной анафилаксии (I.
18 Общая аллергология
Г л а в а VII АЛЛЕРГИЧЕСКИЕ РЕАКЦИИ КЛЕТОК
В настоящее время накоплен значительный экспериментальный материал, показывающий различные изменения структуры и функции клеток сенсибилизированных животных под влиянием воздействия на них специфического аллергена. Работы, выполненные в этом плане, представлены исследованиями, в которых специфический аллерген в виде «разрешающего» воздействия поражал изолированные клетки крови (эритроциты, лейкоциты, кровяные пластинки), клетки тканевых культур, или, наконец, клетки изолированных органов (гладкомышечные органы, нервные узлы). К этой же группе исследований примыкают работы, в которых изучались изменения функций клеток отдельных органов и тканей в целом организме. Это — большая группа работ по изучению аллергических реакций различных органов (печени, почек, желудочно-кишечного* тракта), покровного эпителия кожи, слизистых оболочек или клеточных элементов мезенхимального происхождения. Обзор этих работ см. у А. Д. Адо (1970).
Источник