Как брать кровь у крыс

Способы взятия крови у крыс

У крыс небольшое количество крови удается взять из ушных раковин. Для этого помощник левой рукой фиксирует крысу, крепко зажимая конечности, а большим и указательным пальцами натягивает кожу шеи, сдавливая сосуды этой области и создавая застой крови и гиперемию ушных раковин. Из ушной раковины возможны повторные заборы крови через 3—5 суток. Содержание эритроцитов, лейкоцитов и лейкоцитарная формула крови при повторных взятиях крови из ушной раковины крыс остается без изменений, в то время как при повторных взятиях крови после ампутации кончика хвоста из-за возникающей воспалительной реакции увеличивается число лейкоцитов. Для забора крови из бедренной или яремной вен крыс подвергают наркозу.
Для получения больших количеств крови прибегают у взрослых крыс к пункции хвостовой вены. Хвост обогревают теплой водой, дезинфицируют; вену сдавливают у корня хвоста, вводят в сосуд иглу и шприцем отсасывают кровь. Нередко ДЛЯ взятия крови обрезают кончик хвоста, после чего собирают кровь, вытекающую из раны. Из кончика хвоста удается получить значительное количество крови, вакуумно отсасывая ее. Однако, чтобы взять кровь из вен хвоста, не обязательно отрезать его кончик. Для этого достаточно острой бритвой сделать надрез кончика хвоста наискось, по спирали. Такая рана менее травматична, она быстро заживает.
Кровь из бедренной вены берут под наркозом. Вену отпрепаровывают, вскрывают. Из вскрытого сосуда кровь накопляется в ране. После взятия крови рану тампонируют и зашивают.
Весьма удобно брать кровь у крыс, а также у других мелких лабораторных животных из ретробульбарного венозного сплетения при помощи пастеровской микропипетки (кончик пипетки должен быть слегка заточенным и иметь в диаметре не более 1 мм). Для этого наркотизированную крысу захватывают левой рукой за кожу шеи большим и указательным пальцами, а другими пальцами надежно удерживают за кожу спины. Микропипетку берут в правую руку. Концом пипетки пробуравливающими движениями прокалывают конъюнктиву внутреннего угла глаза и проводят ее на глубину 1—2 мм за глазное яблоко, где находится венозное сплетение. При правильном введении в капилляр микропипетки из ретроорбитального сплетения самотеком поступает кровь. При необходимости взять, большое количество крови следует натянуть кожу в области шеи, чтобы сдавить яремные вены и создать венозный застой, т.е. повысить венозное давление в ретроорбитальном венозном сплетении (рис. 78). При взятии крови из венозного сплетения глазницы необходимо следить, чтобы в пипетку не попала слезная жидкость. Описанный способ прост, позволяет брать кровь при хронических наблюдениях. Редко возникают осложнения в виде повреждения глаза и его слепоты.

Источник

Способы взятия крови у мышей

Небольшое количество крови (2—3 капли) удается получить после прокола лапы или ампутации кончика хвоста (перед обрезанием хвост подогревают водой температурой 40—45 °C и дезинфицируют). После взятия крови рану на хвосте прижигают раствором йода. Можно получать кровь у мышей из хвостовых сосудов вакуумным способом Кончик хвоста смазывают ксилолом и отрезают его. На рану наносят каплю 5 %-го раствора цитрата натрия, после чего хвост вставляют в одно из отверстий специального баллончика, стенки которого парафинированы. Сквозь второе отверстие вакуумным насосом отсасывают воздух и при давлении 2,6—5,3 кПз в пробирку насасывают кровь. Указанным способом получают 0,2— 0,5 мл крови, сохраняя жизнь животного. Повторное взятие крови производят через 2—5 дней.
Н.Д. Пастернак (1976) разработал микрометодику забора крови у лабораторных мышей, которая позволяет повторно (по 5—6 paз в месяц) у одних и тех же мышей определять число эритроцитов, лейкоцитов, ретикулоцитов, тромбоцитов, содержание гемоглобина, лейкоцитарную формулу Для этого у фиксированного животного пунктируют хвостовую вену. Кровь в количестве 10 мкл набирают в микропипетку и быстро смешивают ее в первой пробирке (размер пробирки 77х10 мм) со 190 мкл 1 %-го раствора хлорида натрия, приготавливают мазки для подсчета лейкоцитарной формулы и ретикулоцитов. Затем на место укола наносят капли 6 %-го водного раствора ЭДТА и приготавливают мазок для подсчета тромбоцитов. Из первой пробирки берут 10 мкл взвеси крови и переносят ее во вторую пробирку, содержащую 90 мкл 3 %-го раствора хлорида натрия, получая разведение эритроцитов 1:200, пригодное для их подсчета. После этого в первую пробирку добавляют 10 мкл ледяной уксусной кислоты, сохраняя разведение крови 1:20, необходимое для подсчета лейкоцитов. Для подсчета лейкоцитов забирают 10 мкл гемолизата. Затем в первую пробирку с раствором ацетата гематина добавляют 1,8 мл 3 %-й уксусной кислоты, содержимое пробирки перемешивают и определяют содержание гемоглобина на ФЭКе при синем светофильтре (длина волны 453 нм).
Весьма удобным является взятие крови у мышей из ретроорбитального венозного сплетения. Техника взятия крови такая же, как и для крыс. Кончик микропипетки должен быть заточен под углом 45°. Микропипеткой у мышей можно взять кровь и из подъязычного венозного сплетения. Для этого левой рукой следует удерживать мышь за кожу шеи, слегка натягивая ее и сдавливая вены шеи. Пинцетом открывают рот, поднимают язык, прокалывают кончиком микропипетки слизистую в области подъязычного венозного сплетения, которое отчетливо выступает. В капилляр пипетки кровь поступает самотеком.
Пункция сердца. После выстригания шерсти и дезинфекции места укола животное наркотизируют и фиксируют животом кверху Пальпаторно определяют место наилучшего ощущения сердечного толчка и на 4—5 мм краниальнее от этого пункта у левого края грудины делают прокол Пункцией сердца удается получить до 0,5 мл крови.
Путем декапитации у мыши получают примерно 0,5—0,6 мл крови.

Источник

Забор крови у грызунов

Автор: Кузнецов Петр Александрович

К представителям отряда грызунов, ставшим домашними питомцами, обычно относятся морские свинки, крысы, мыши, шиншиллы.

Анализы крови могут потребоваться врачу-ратологу (специалисту по грызунам) для проведения диагностики и уточнения общего состояния животного.

У более крупных представителей отряда (крысы, морские свинки, шиншилы) кровь можно получить из вены, находящейся на внутренней поверхности бедра (вена Сафена) или вены запястья. Если животное агрессивно – процедура может быть проведена под общей анестезией.

В процедуре обычно участвуют 2 ветеринарных специалиста. Проводится асептическая обработка месте взятия крови. Вена аккуратно пережимается выше места взятия. Проводится прокол вены и взятие нужно количества образца крови.

У мышей, в связи с их миниатюрностью, получить анализ крови крайне затруднительно. В случае необходимости анализ можно получить из хвостовой вены. Однако, есть риск атрофии хвоста после этой процедуры.

Общий объем крови у грызуна 55-70 мл/кг. То есть у крысы около 15-20 мл, у мыши около 4-5мл. Безопасно для животного единовременное взятие до 10% от общего объема крови. Таким образом, у крысы можно получить анализ 1,5-2 мл, которого хватит для исследования на 6-8 показателей. У мыши только 0,4-0,5 мл, такой объем можно исследовать на 1-3 показателя. При необходимости можно взять больший объем крови, в этом случае дефицит должен быть восполнен инфузией полиэлектролитного раствора.

В целом, процедура взятия крови достаточно проста и безопасна, однако требует участия квалифицированного специалиста.

Статья подготовлена Кузнецовым П.А.,
ветеринарным врачом-кардиологом, анестезиологом «МЕДВЕТ»
© 2015 СВЦ «МЕДВЕТ»

Источник

12.4. Техника взятия крови у лабораторных животных

Небольшое количество крови получают у кроликов и мор­ских свинок из вен уха, у мышей и крыс – из вен хвоста, а большие количества – из сердца. В особых случаях прибегают к полному, или тотальному, обескровливанию, после которого животное погибает.

В табл. 12.3 приведены данные о максимальных количествах крови и интервалах времени, через которые можно брать кровь у животных.

Таблица 12.3. Схема взятия крови от животных-доноров

Масса тела донора, г

Максималь­ное количест­во крови, до­пускаемое для взятия одномо­ментно, мл

Интерва­лы време­ни между взятием крови, сут

Максималь­ное количест­во крови, получаемое при тоталь­ном обескров­ливании, мл

Для пункции сердца животных фиксируют к доске брюш­ком кверху. Шерсть в области груди тщательно выстригают, кожу обрабатывают спиртовым раствором йода и после этого приступают к пункции сердца, имеющей некоторые различия в зависимости от вида животного.

Пункция сердца у кроликов. Определяют II пальцем, обрабо­танным спиртом и смазанным спиртовым раствором йода, сердечный толчок, т.е. точку наиболее сильно выраженной пульсации сердца. Обычно она прощупывается в третьем меж-реберье. Прокол грудной клетки делают в области сердечного толчка на расстоянии 2–4 мм от левого края грудины, иглу ведут в направлении к средней линии на глубину 2–2,5 см. При попадании иглы в полость сердца рука, в которой нахо­дится шприц, начинает ощущать ритмичные толчки, связанные с пульсацией сердца и приподнимающие иглу. Поршень шпри­ца легко выдвигается наружу и в цилиндре его тотчас появля­ется кровь. Взятие крови должно производиться по возмож­ности быстрее во избежание ее свертывания. По этой же при­чине шприц и иглу рекомендуется промывать перед опытом стерильным раствором цитрата или оксалата натрия. Взяв не­обходимое количество крови, быстрым движением, без рывка вынимают иглу и на место укола накладывают ватный тампон, пропитанный спиртовым раствором йода. Животному подкож­но вводят подогретый до температуры тела стерильный изото­нический раствор хлорида натрия или глюкозу в количестве, равном двойному объему взятой крови. Пункцией сердца мож­но получить у кролика 25–30 мл крови.

Пункция сердца у морских свинок. Кончиками III–IV пальцев левой руки нащупывают сердечный толчок, в направлении которого вертикально на глубину 1,5–2 см вкалывают иглу, отступя 1–2 мм от левого края грудины. У морских свинок можно получить таким образом 10–12 мл крови.

Пункция сердца у крыс. Как и в предыдущих случаях, паль-паторно определяют место сердечного толчка. На 1 см выше от установленной точки и на 1–2 мм левее от края грудины делают прокол на глубину 1,5–2 см, держа иглу вертикально. Одномоментно у крыс можно получить 6–8 мл крови.

Тотальное обескровливание кролика. Вскрывают одну из сон­ных артерий, расположенных по обе стороны трахеи. Для по­лучения стерильной крови руки оперируемого должны быть тщательно вымыты и обработаны спиртом или спиртовым рас­твором йода, все инструменты предварительно необходимо простерилизовать.

Подготовленного для кровопускания кролика привязывают к станку брюшком кверху, фиксируя голову кольцом к штати­ву. Шерсть на шее тщательно выстригают, кожу дезинфициру­ют. К носу животного прикладывают кусочек ваты, смоченной эфиром. После того как наступит состояние наркоза, скальпе­лем делают разрез по средней линии шеи и разводят края раны пинцетом. Сонные артерии проходят по бокам трахеи в ярем­ном желобке между веной и нервом. Сверху артерия прикрыта грудиноподьязычной и грудинощитовидной мышцами. Поэто­му для обнаружения нервно-сосудистого пучка эти мышцы разделяют тупым концом скальпеля или браншами пинцета. Артерию освобождают от окружающей соединительной ткани и подводят под нее две лигатуры. Ближайшую к головке лига туру завязывают двойным узлом, позади второй лигатуры

Рис. 12.9. Введение канюли в артерию

при обескровли­вании животных.

на расстоянии 0,3–0,5 см накладывают пеан. Между лигатурой и пеаном маленькими остроконечными ножницами делают про­дольный разрез сосуда длиной не более 1,5–2 мм, вставляя в него канюлю (стеклянную трубочку с оттянутым капилляром, кончик которой скошен и хорошо оплавлен). Кончик встав­ленной канюли укрепляют второй лигатурой. После этого под резиновую трубку, надетую на расширенную часть канюли, подставляют пробирку или флакон и снимают пеан с артерии, чтобы кровь могла вытекать свободно (рис. 12.9). Обескровли­вание морских свинок производят так же, как и кроликов.

Взятие крови из вены уха кролика. Для получения крови из краевой вены нужно прежде всего вызвать гиперемию уха, потирая его ладонями рук и слегка ударяя кончиками пальцев. Затем вдоль наружного края уха удаляют пушок и протирают этот участок уха ватой, увлажненной 70% спиртом. Если в результате всех перечисленных процедур сосуды не инъециру­ются, ухо смазывают ксилолом или толуолом. После того как сосуды набухнут и четко обозначатся на поверхности ушной раковины, наружную поверхность ее покрывают тонким слоем жидкого парафина (во избежание быстрого свертывания крови) и делают прокол вены.

Для получения небольшого количества крови (менее 1 мл) прокалывают одну из небольших периферических ветвей, а для получения больших объемов крови (5–10 мл) вскрывают кра­евую вену уха. С этой целью иглу шприца вводят в вену почти параллельно поверхности уха, чтобы не повредить противопо­ложную стенку вены. При проколе вены иглой шприца кровь, как правило, выходит отдельными каплями с большими интер­валами и кровотечение прекращается быстро. Для того чтобы вызвать обильное кровотечение, нужно сделать ранку с рваны­ми краями. С этой целью пользуются обломком тонкого ка­пилляра пастеровской пипетки. При таком способе прокола из уха кролика получают до 30 мл крови.

После взятия крови к проколу вены прикладывают на 2– 3 мин кусочек сухой стерильной ваты, не нажимая сильно на стенку сосуда, так как при этом кровотечение может усилиться. Если кровотечение долго не прекращается, хорошие результаты дает нанесение на ранку нескольких капель перекиси водорода.

Взятие крови из вен у морских свинок, крыс и мышей. У мор­ских свинок кровь в количестве 0,3–0,5 мл получают после нанесения насечек на край уха или прокола мягких подушек лапы.

У белых крыс и мышей для получения 1–3 капель крови приходится прибегать к ампутации кончика хвоста после про­должительного прогревания его в воде температуры 45–50°С или протирания ксилолом. Взяв кровь, рану прижигают пере­кисью водорода.

В.М.Концова (1968) предложила способ, позволяющий по­лучить у крыс 0,5–1 мл крови из венозного сплетения, лежа­щего в орбите, позади глазного яблока. Взятие крови произво­дят стеклянной пипеткой с оттянутым капилляром (наружный диаметр 0,6 мл), острие которого сточено под углом 45°.

Животное берут I и II пальцами левой руки со стороны спины за шею и слегка сдавливают с боков, вызывая легкое выпячивание глаз. Вращательным движением пипетки делают прокол конъюнктивального мешка в медиальном углу глаза между глазным яблоком и орбитой. После прокола пипетку ведут в направлении гортани на глубину 4–5 мм. Попадание в венозное сплетение сопровождается заполнением капилляра пипетки кровью.

Источник