Количество лейкоцитов у крыс
В связи с усиленными темпами освоения Крайнего Севера в настоящее время вопрос адаптации организма человека к жизни в северных широтах, где он подвергается воздействию низких природных температур, вновь становится актуальным [1; 2].
Известно, что на негативное воздействие различных факторов окружающей природной среды организм человека отвечает мобилизацией адаптационных механизмов регуляции функционирования систем, в том числе и системы крови, что может проявляться изменением её клеточного состава [3; 4]. В осуществлении защитной реакции организма большую роль играют лейкоциты, которые обеспечивают неспецифический и специфический клеточный иммунитет организма и отвечают на воздействия любых стресс-факторов. При длительном или чрезвычайно сильном воздействии неблагоприятных факторов происходят изменения иммунологической реактивности, приводящие к снижению адаптационных возможностей организма, к развитию транзиторных или стойких форм вторичной иммунной недостаточности [5].
Дисбаланс иммунной системы оказывает влияние на формирование, характер течения и исходы многих патологических процессов. Наиболее высокие уровни заболеваемости в условиях Крайнего Севера приходятся на болезни органов дыхания, нервной системы, органов чувств и системы кровообращения [1; 6; 7].
Таким образом, актуальность исследования механизмов адаптации системы крови и реакций иммунных органов на холодовое воздействие продиктована необходимостью поиска путей повышения сопротивляемости организма к низким температурам, разработки мер профилактики и коррекции нарушений иммунного ответа организма людей, постоянно и временно проживающих в условиях Заполярья, в том числе и Республики Саха (Якутия). Эта медико-социальная проблема требует глубокой и всесторонней проработки, прежде всего, на теоретическом уровне.
Данное исследование является частью комплексной работы, связанной с изучением механизмов дезадаптации в условиях Арктики и Субарктики. Данная работа проводится с учетом приоритетных направлений научной платформы «Иммунология» государственной программы «Стратегия развития медицинской науки в Российской Федерации на период до 2025 года».
Целью исследования является изучение изменений клеточного состава крови крыс в зависимости от времени их экспозиции в условиях холодового воздействия.
Материалы и методы исследования. Исследование проводили на 40 беспородных крысах-самцах массой тела 200-300 г. Выбор пола животных был продиктован необходимостью получения стабильных результатов, исключая влияние циклических изменений, характерных для организма самок. Методом случайной выборки животные были распределены на контрольную группу и опытную, разделенную на 4 подгруппы по 8 особей в каждой. Животные находились в стандартных условиях вивария, соответствующих требованиям санитарно-эпидемиологических правил СП 2.2.1.3218-14 «Санитарно-эпидемиологические требования к устройству, оборудованию и содержанию экспериментально-биологических клиник (вивариев)» (2014). Экспозицию опытных крыс производили в холодильных камерах при температуре -20 ºС с соблюдением адекватных условий влажности и вентиляции в течение 60 минут ежедневно на протяжении 30 суток.
Протокол экспериментальной части исследований, использованный на этапах содержания животных, моделирования патологических процессов и выведения их из опыта, соответствовал принципам биологической этики, изложенным в Международных рекомендациях по проведению медико-биологических исследований с использованием животных (1985); Европейской конвенции о защите позвоночных животных, используемых для экспериментов или иных научных целей (Страсбург, 1986); Приказе МЗ СССР № 755 от 12.08.1977 г. «О мерах по дальнейшему совершенствованию организационных форм работы с использованием экспериментальных животных»; Приказе МЗ РФ № 267 от 19.06.2003 г. «Об утверждении правил лабораторной практики» [8].
Исследования проводили сразу после получения проб крови на 7-е (1-я подгруппа),
14-е (2-я подгруппа), 21-е (3-я подгруппа), 30-е сутки (4-я подгруппа) после начала эксперимента. Животных выводили из опыта методом декапитации с соблюдением требований гуманности, согласно Приложению № 4 «О порядке проведения эвтаназии (умерщвления) животного» к Правилам проведения работ с использованием экспериментальных животных (приложение к Приказу МЗ СССР № 755 от 12.08.1977). Кровь получали во время декапитации животного. Гематологические исследования проводили на автоматизированном гематологическом анализаторе AbacusJunior 30, биохимические исследования сыворотки крови – на биохимическом анализаторе Mindray BA-88A с применением растворов HigtTehnology.
Статистическую обработку данных осуществляли с использованием пакета программ Statistica 6.0. После проверки вариационных рядов на правильность распределения значимость различий между ними определяли параметрическим методом с расчётом средней арифметической, ошибки средней арифметической (М±m) и t-критерия Стьюдента. Различие считали значимым при р
Источник
Количество лейкоцитов у крыс
В медицинской биотехнологии постановка экспериментов при помощи моделирования патологических состояний, например ожогового повреждения кожи, имеет огромное значение для глубокого исследования крови и кроветворных органов [3]. Исходя из этого, необходимо тщательное и всестороннее изучение всех изменений, которые происходят в организме при этих воздействиях. Главным образом это относится к системам поддержания гомеостаза [2].
Ожоговые поражения кожи стали в современном мире одним из наиболее социально значимых и распространенных типов травматических повреждений у человека. Изучению вопроса реакции клеток крови на ожоги посвящен ряд исследований [1, 8].
Любое заболевание, патологический процесс, а также ряд физиологических сдвигов могут в той или иной степени отразиться на количественных и качественных особенностях состава циркулирующей крови [5]. Этим и определяется огромное значение необходимости изучения крови. Белые клетки крови, имея высокую реактивность, быстро включаются в адаптационные реакции. Они способны к неспецифическому реагированию в ответ на альтерирующие воздействия.
Термическая травма сопровождается развитием интоксикации. Кровь в первую очередь подвергается действию токсических веществ, возникших в очаге поражения [1].
Свой вклад в общее состояние системы организма вносят компоненты крови. Наиболее уязвимым объектом для действия продуктов свободнорадикального окисления липидов является стенка кровеносных сосудов, что обусловлено высоким уровнем кислорода в крови и низким уровнем его утилизации [9]. В условиях патологического процесса происходит поражение неклеточного компонента сосудистой стенки.
Цель исследования – изучение показателей периферической крови половозрелых крыс в норме и в условиях термического воздействия.
Материалы и методы. Объектом исследования явились 50 беспородных крыс-самцов 4-месячного возраста. Во время эксперимента регистрировали общее состояние и поведение животных. Самцы крыс были разделены на пять групп по типу воздействия:
I группа – животные, не подвергшиеся ожоговому воздействию (контрольная, 10 шт.);
II группа – животные, получившие ожоговое воздействие и не подвергшиеся терапии (10 шт.). Раны регенерировали естественным путем;
III группа – животные, получившие ожоговое воздействие и подвергшиеся терапии спреем «Д-Пантенол» (10 шт.);
IV группа – животные, получившие ожоговое воздействие и подвергшиеся терапии бальзамом мазевой формы «Спасатель» (10 шт.);
V группа – животные, получившие ожоговое воздействие и подвергшиеся терапии аппликациями настойки календулы (10 шт.).
Исследование морфологических и биохимических показателей периферической крови заключалось в определении количества лейкоцитов, количества эритроцитов, лейкоцитарной формулы, уровня гемоглобина, перекисной резистентности эритроцитов.
Уровень гемоглобина в образцах крови крыс определяли электрофотометрическим способом на гемоглобинометре APEL Hemoglobinmeter HG-202. Мазки фиксировали и окрашивали по Романовскому – Гимзе. Идентификация форменных элементов крови проводилась согласно методике Н. Т. Ивановой [4]. Количество эритроцитов крови подсчитывали по стандартной методике в камере Горяева. Количество лейкоцитов считали по мазкам крови крыс.
Для оценки уровня свободнорадикального окисления и выраженности в связи с этим липолитических процессов в крови проводили измерение перекисной резистентности эритроцитов. Перекисный гемолиз эритроцитов является чувствительным показателем, отражающим про– и антиоксидантный баланс организма [6].
Для определения перекисного гемолиза эритроцитов использовали модификацию методов определения степени перекисного гемолиза эритроцитов (ПГЭ) А. А. Покровского и А. А. Абразцова [7], которую предложили А. Е. Лазько, Р. И. Асфандияров и А. А. Резаев [4].
Результаты исследования и их обсуждение. Анализ гематологических исследований экспериментальных животных показал, что наиболее высокий уровень гемоглобина периферической крови наблюдался у крыс, лечившихся бальзамом «Спасатель» и спреем «Д-пантенол», что наглядно отображено в таблице 1. В группе крыс, лечившихся настойкой календулы, данный показатель незначительно отличался от значений у обожженных животных, не получавших лечения.
Гематологические показатели через 3 суток после ожоговой травмы
Источник
Количество лейкоцитов у крыс
В результате многолетних исследований нами установлено, что лабораторные крысы инвазированы локализующимися в желудочно-кишечном тракте гельминтами, которых отнесли к 4 видам, в том числе 2 видам цестод и 2 видам нематод. Класс Cestoda представлен видами Rodentolepis straminea, Hymenolepis diminuta, а класс Nematoda видами: Syphacia obvelata, Aspiculuris tetraptera. Среди выявленных видов один вид Hymenolepis diminuta являются биогельминтом, а три вида Syphacia obvelata, Aspiculuris tetraptera, Rodentolepis straminea – геогельминтами. Гельминтами оказались заражены из 121 крысы, подвернутой гельминтологическим исследованиям, 48 или (39,66 %). Цестоды: Rodentolepis straminea было инвазировано 21 или 17, 4 % животных с ИИ от 1 до 7 экз. (в среднем 5,04 экз./особь), Hymenolepis diminuta 10 или 8,3 % с ИИ от 1 до 3 экз. (в среднем 2,00 экз./особь). Из нематод у лабораторных животных чаще всего встречались Syphacia obvelata 14 или ЭИ = 11,57 %, ИИ = 10,08 экз./особь, Aspiculuris tetraptera находили у 13 крыс, ЭИ 10,74 %, при ИИ от 5 до 23 экз. (в среднем 9,64 экз./особь). Гельминтами одного вида было заражено 18,55 %, двумя видами – 10,34 % и тремя видами – 1,45 % крыс. По ЭИ на первом месте стоят цестоды, обнаруженные у 17,4 % животных, на втором месте нематоды (у 10,74 % животных). В результате анализа показателей периферической крови у крыс отмечается, снижение общего количество лейкоцитов. Так, при гельминтозах у крыс выявлено повышение эозинофилов до 17,73 ± 2,72 и общего количества лейкоцитов до 21,3 ± 2,0. Значительные сдвиги наблюдаются в кристаллоскопической картине 2. Все эти показатели находятся в прямой зависимости от интенсивности инвазии. Также учитывая, что человек может заражаться всеми видами сифаций и гименолеписами, необходимы массовые эпизоотологические исследования грызунов на гельминтозы и разработка эффективных профилактических мероприятий.
Источник