Норма эритроцитов у крысы

Норма эритроцитов у крысы

В медицинской биотехнологии постановка экспериментов при помощи моделирования патологических состояний, например ожогового повреждения кожи, имеет огромное значение для глубокого исследования крови и кроветворных органов [3]. Исходя из этого, необходимо тщательное и всестороннее изучение всех изменений, которые происходят в организме при этих воздействиях. Главным образом это относится к системам поддержания гомеостаза [2].

Ожоговые поражения кожи стали в современном мире одним из наиболее социально значимых и распространенных типов травматических повреждений у человека. Изучению вопроса реакции клеток крови на ожоги посвящен ряд исследований [1, 8].

Любое заболевание, патологический процесс, а также ряд физиологических сдвигов могут в той или иной степени отразиться на количественных и качественных особенностях состава циркулирующей крови [5]. Этим и определяется огромное значение необходимости изучения крови. Белые клетки крови, имея высокую реактивность, быстро включаются в адаптационные реакции. Они способны к неспецифическому реагированию в ответ на альтерирующие воздействия.

Термическая травма сопровождается развитием интоксикации. Кровь в первую очередь подвергается действию токсических веществ, возникших в очаге поражения [1].

Свой вклад в общее состояние системы организма вносят компоненты крови. Наиболее уязвимым объектом для действия продуктов свободнорадикального окисления липидов является стенка кровеносных сосудов, что обусловлено высоким уровнем кислорода в крови и низким уровнем его утилизации [9]. В условиях патологического процесса происходит поражение неклеточного компонента сосудистой стенки.

Цель исследования – изучение показателей периферической крови половозрелых крыс в норме и в условиях термического воздействия.

Материалы и методы. Объектом исследования явились 50 беспородных крыс-самцов 4-месячного возраста. Во время эксперимента регистрировали общее состояние и поведение животных. Самцы крыс были разделены на пять групп по типу воздействия:

I группа – животные, не подвергшиеся ожоговому воздействию (контрольная, 10 шт.);

II группа – животные, получившие ожоговое воздействие и не подвергшиеся терапии (10 шт.). Раны регенерировали естественным путем;

III группа – животные, получившие ожоговое воздействие и подвергшиеся терапии спреем «Д-Пантенол» (10 шт.);

IV группа – животные, получившие ожоговое воздействие и подвергшиеся терапии бальзамом мазевой формы «Спасатель» (10 шт.);

V группа – животные, получившие ожоговое воздействие и подвергшиеся терапии аппликациями настойки календулы (10 шт.).

Исследование морфологических и биохимических показателей периферической крови заключалось в определении количества лейкоцитов, количества эритроцитов, лейкоцитарной формулы, уровня гемоглобина, перекисной резистентности эритроцитов.

Уровень гемоглобина в образцах крови крыс определяли электрофотометрическим способом на гемоглобинометре APEL Hemoglobinmeter HG-202. Мазки фиксировали и окрашивали по Романовскому – Гимзе. Идентификация форменных элементов крови проводилась согласно методике Н. Т. Ивановой [4]. Количество эритроцитов крови подсчитывали по стандартной методике в камере Горяева. Количество лейкоцитов считали по мазкам крови крыс.

Для оценки уровня свободнорадикального окисления и выраженности в связи с этим липолитических процессов в крови проводили измерение перекисной резистентности эритроцитов. Перекисный гемолиз эритроцитов является чувствительным показателем, отражающим про– и антиоксидантный баланс организма [6].

Для определения перекисного гемолиза эритроцитов использовали модификацию методов определения степени перекисного гемолиза эритроцитов (ПГЭ) А. А. Покровского и А. А. Абразцова [7], которую предложили А. Е. Лазько, Р. И. Асфандияров и А. А. Резаев [4].

Результаты исследования и их обсуждение. Анализ гематологических исследований экспериментальных животных показал, что наиболее высокий уровень гемоглобина периферической крови наблюдался у крыс, лечившихся бальзамом «Спасатель» и спреем «Д-пантенол», что наглядно отображено в таблице 1. В группе крыс, лечившихся настойкой календулы, данный показатель незначительно отличался от значений у обожженных животных, не получавших лечения.

Гематологические показатели через 3 суток после ожоговой травмы

Источник

Норма эритроцитов у крысы

Имеются многочисленные исследования, установившие зависимость между активностью ПОЛ в эритроцитах, состояния антиоксидантной системы крови и развитием патологического процесса.

Повышение концентрации ПОЛ сопровождается деструкцией липидного слоя мембран эритроцитов. Строгое соотношение белкового и липидного бислоев мембран эритроцитов нарушается, что приводит к изменению их проницаемости (Кучеренко Н.В., Васильев А.Н., 1985).

По — видимому, эритроцитарные мембраны, в липидном слое которых активируются реакции перекисного окисления, становятся более проницаемыми для кислорода, что создает дополнительные условия для инициации « активных форм кислорода». Эти изменения сопровождаются нарушением кислородфиксирующей и кислородтранспортирующей функций эритроцитов, способствующих развитию гипоксии тканей.

Материал и методика исследования.

Опыт проведен на базе лаборатории экспериментальной физиологии кафедры АФЧЖ в период с 25 мая по 30 июня 2005 года.

В работе было использовано 42 старых самца белых беспородных крыс средней массой 230 г. Экспериментальных животных содержали в стандартных условиях вивария. При проведении опыта была использована следующая схема эксперимента:

1. Интактные животные.
2. Животные, подвергнутые иммобилизационному стрессу (ежедневно по 2 часа в тесном пластиковом стакане в течение 7 дней, начиная со второй недели эксперимента).
3. Животные, получавшие витамин Е per os в дозе 0,5мг/100 г. массы тела ежедневно в течение 14 дней.
4. Животные, подвергнутые воздействию иммобилизационного стресса + витамин Е.
5. Животные, которым вводили эмоксипин в дозе 1% р-р. 0,5мг/ 100г. массы тела в течение 7 дней внутримышечно.
6. Животные, которым вводили эмоксипин по указанной выше схеме и подвергали воздействию иммобилизационного стресса.

По окончанию опыта животных декапитировали. Для определения перекисного гемолиза эритроцитов использовали модификацию методов определения степени перекисного гемолиза эритроцитов (ПГЭ) А.А. Покровского и А.А. Абразцова (1964), которую предложили А.Е. Лазько, Р.И. Асфандияров и А.А. Резаев (1993).

Полученные данные подвергнуты статистической обработки с использованием критерия t/p Стьюдента.

Результаты исследования

Перекисный гемолиз эритроцитов является чувствительным показателем, отражающим про — и антиоксидантный баланс организма. Изменение перекисного гемолиза эритроцитов в результате опыта приведены в таблице.

Таблица 1. Изменение степени перекисного гемолиза эритроцитов под влиянием иммобилизационного стресса и антиоксидантов различной природы у самцов белых крыс

Источник

Норма эритроцитов у крысы

Эритроциты представляют собой клетки крови, изменение формы которых приводит к нарушению их основной функции, а именно способности переносить кислород, свободно перемещаясь по гемокапиллярам. Особенность эритроцитов заключается в их форме клетки – двояковогнутой форме диска. Данная форма обеспечивает наибольшее соотношение площади поверхности к объему клетки и гарантирует максимальную эластичность для свободного прохождения через капиллярные сосуды. При патологических состояниях под воздействием каких либо причин эритроциты изменяют свою форму и размер. Эритроциты с изменённой формой (сфероциты, стоматоциты и др.), не обладая высокой эластичностью, уже не могут проходить в узкие капилляры, общая площадь их поверхности становится меньше как минимум на 20 % от нормального соотношения.

Изменение структуры эритроцитов может происходить под действием как внутренних (эндогенных) факторов, так и под воздействием факторов окружающей среды [1, 2]. Мембраны эритроцитов очень чувствительны к внешним воздействиям. Изменение формы эритроцитов – процесс энергетически-зависимый и связан с концентрацией АТФ. Её снижение вызывает повышение чувствительности эритроцитов к факторам окружающей среды.

Метод анализа цитоархитектоники эритроцитов может быть использован как один из методов токсикологических исследований для оценки функциональных питьевых вод, рекомендуемых с целью оздоровления организма, в соответствии с современными требованиями как гигиенической оценки безопасности, так и биологической эффективности [3]. Электронномикроскопически в сканирующем режиме может быть получена информация о поверхностной геометрии эритроцитов, что позволит оценить структурно-функциональные свойства их мембран, а так как существует корреляция между изменением структуры мембран эритроцитов и других клеток организма [4], то и процессов повреждения клеточных мембран всего организма в целом.

В гигиене питьевых вод продолжают развиваться исследования, связанные с проблемой оценки качества питьевой воды при изменении ее структурного и изотопного водородно-кислородного состава [5]. Вода, являясь практически протиевой водой, имеет в своем составе другие изотопные модификации, содержание которых составляет 0,23 %, что сопоставимо с содержанием солей и микроэлементов в питьевой воде.

В основе механизма действия различных концентраций дейтерия на животных лежит влияние реакций изотопного обмена (D/H) на скорость биологических процессов в клетке (К. Райхардт, 1991). На молекулярном уровне этот механизм доказан, вода с пониженной концентрацией дейтерия увеличивает скорость биологических реакций (теpмодинамичеcкое cоcтояние нуклеиновыx киcлот, cкоpоcть пpоцеccов тpанcкpипции и тpанcляции, репарационные процессы ДНК, каскадные реакции дыхательной цепи митохондрий, аппарат биосинтеза, т.е. именно те клеточные системы, которые используют высокую подвижность протонов и высокую скорость разрыва водородных связей [6], а повышенное содержание дейтерия в воде, наоборот, стабилизирует клеточные структуры. В связи с этим целью настоящего исследования являлась оценка действия повышенного и пониженного содержания дейтерия в питьевой воде на показатели цитоархитектоники эритроцитов и клеток эритроидного ряда костного мозга крыс в хроническом эксперименте.

Материалы и методы исследования

Изучение влияния питьевых вод с различным содержанием дейтерия (10 ppm и 1000 ppm) на показатели состояния животных проводилось в хроническом эксперименте. В качестве контроля использовали воду с содержанием дейтерия 145 ppm, соответствующей концентрации дейтерия в московской водопроводной воде.

Общее состояние животных оценивали по показателям изменения массы тела, уровня водопотребления и поведению животных.

Исследования проводили на крысах-самцах массой в начале эксперимента 270 г. Животных содержали в условиях искусственного освещения (12 ч в сутки), постоянного доступа к стандартному комбинированному корму в клетках по 6 животных. Животные находились на свободном водопотреблении.

Электронномикроскопически в сканирующем режиме на «Hitachi-3010» анализировали цитоархитектонику эритроцитов, полученных из венозной крови после префиксации глутаральдегидом с дофиксацией OsO4 по стандартной методике (Б.В. Втюрин, А.А. Пальцын, 1996 г.) Затем проводилось обезвоживание в ацетоне и высушенные образцы покрывали слоем золота (толщиной в 200 А) в вакуумном испарителе. Для каждого животного просматривали на экране электронного микроскопа 250–280 эритроцитов и высчитывали процентное соотношение различных эритроцитов, классифицировав их по 12 типам (Г. Козинец, 1984). Статистические различия между показателями по отношению к контрольной группе определялись по непараметрическому критерию (U-критерий) Манна – Уитни. Достоверными считались изменения при Р

Источник

Норма эритроцитов у крысы

В природных и производственных условиях нашего времени организм нередко испытывает влияние жестких факторов окружающей среды. Картину патофизиологических изменений организма подтверждает анализ крови [1]. Белые клетки крови, имея высокую реактивность, быстро включаются в адаптационные реакции. Они способны к неспецифическому реагированию в ответ на стрессогенные воздействия. Красные кровяные клетки также способны отразить динамику изменений при проведении биохимических исследований [3]. При этом чувствительным показателем, отражающим антиоксидантное равновесие организма, является состояние плазматической мембраны эритроцитов. Под действием осмотических сил вода поступает из гипотонического раствора внутрь эритроцитов. Они набухают, мембрана их растягивается, а затем под действием механических сил разрушается. При этом раствор, содержащий кровь, становится прозрачным и приобретает ярко-красный цвет («лаковая кровь»). Осмотический гемолиз эритроцитов здорового человека начинается в 0,46–0,48 % растворах натрия хлорида и полностью завершается (разрушаются все эритроциты, и образуется «лаковая кровь») в 0,32–0,34 % растворах той же соли [5].

Исследование состояния осмотического гемолиза эритроцитов при модуляции стрессорных воздействий является целью работ многих ученых [2, 3, 4]. Особый научный интерес вызывают особенности осмотической резистентности эритроцитов при экспериментальной термической травме.

В связи с этим целью исследования явилось изучение осмотической резистентности эритроцитов при экспериментальной термической травме у крыс разного пола.

Для достижения цели были поставлены и решены следующие задачи:

• выявить особенности осмотического гемолиза эритроцитов при экспериментальной термической травме у крыс

• сравнить степень осмотической резистентности эритроцитов в зависимости от пола животных – крыс самок и самцов.

Работа проводилась на кафедре биологии и ботаники Астраханского государственного медицинского университета в весенний период 2016 года. В эксперименте участвовало 40 животных обоего пола в возрасте 7 месяцев, средней массой 230 гр. Все процедуры, связанные с животными, выполнялись в полном соответствии с Приказом № 199 н Минздрава России от 1 апреля 2016 г.

Животные обоего пола были разделены на 4 группы по типу воздействия:

I группа (n=10: 5 самцов, 5 самок) – контрольные животные, не подвергшиеся ожоговому воздействию;

II группа (n=10: 5 самцов, 5 самок) – контрольные животные, подвергшиеся ожоговому воздействию (раны регенерировали естественным путем);

III группа (n=10: 5 самцов, 5 самок) – животные, получавшие аппликации кожи бальзамом «Спасатель» после ожогового воздействия;

IV группа (n=10: 5 самцов, 5 самок) – животные, получившие термический ожог и накожное нанесение спрея «Д-пантенола».

У самок изучались влагалищные мазки для определения фазы эстрального цикла, когда результаты исследований могут быть некорректными. Эксперимент с самками проводился в фазы диэструса и метаэструса.

Осмотическая резистентность эритроцитарной мембраны крови крыс определялась по устойчивости к различным концентрациям гипотонического раствора хлорида натрия – от 0,7 до 0,2 % [4]. Кровь собирали при декапитации крыс в пробирки с антикоагулянтом -гепарином в концентрации 150 ед/мл крови. В каждую пробирку вносили по 0,02 мл крови крыс и оставляли на 30 мин при комнатной температуре. После центрифугирования 10 мин 2000 оборотов определяли начало и окончание гемолиза [5]. Все анализы проводили в день забора крови.

Опыты показали, что термический ожог области спины крыс способствует наиболее полному гемолизу эритроцитов крови крыс (максимальная степень резистентности эритроцитов ≈ 7 %, p

Источник