Признаки сахарного диабета у крыс

Сахарный диабет — группа эндокринных заболеваний, развивающихся вследствие относительного или абсолютного недостатка гормона инсулина или нарушения его взаимодействия с клетками организма, в результате чего развивается гипергликемия — стойкое увеличение содержания глюкозы в крови. Заболевание характеризуется хроническим течением и нарушением всех видов обмена веществ: углеводного, жирового, белкового, минерального и водно-солевого.

Ранними признаками сахарного диабета являются:
Полиурия — проявляется учащённым обильным мочеиспусканием. При этом моча на ощупь очень липкая.
Полидипсия — повышенное потребление воды, часто животные практически все свободное время проводят возле миски с водой или другого источника питья.
Полифагия — неутолимый голод.
Похудание — частый симптом диабета, который развивается несмотря на повышенный аппетит.

Диабет бывает инсулинозависимый (1-го типа) и неинсулинозависимый (2-го типа). К 2-му типу относится также стероидный (медикаментозный) диабет (возникает в результате приема ГКС – дексафорт (очень часто!), дексаметазон и т.п.). Главным признаком стероидного диабета является самостоятельное (без применения инсулина) снижение уровня сахара после отмены ГКС.

Норма уровня сахара в крови – 4-9 моль/л. Измеряется с помощью глюкометра, кровь берется из пальца (срезается коготок чуть дальше обычного или прокалывается сосуд инсулиновой иголкой). Возможно измерение сахара в моче с помощью тест-полосок, но это скорее для контроля общего состояния или для предварительной проверки. Сахара в моче быть НЕ ДОЛЖНО. Ни до, ни после, ни во время еды, ни после какого-то продукта питания. Норма — это четкий негатив по глюкозе. Все остальное требует коррекции. Опасен любой уровень сахара, потому что это означает нарушения в обмене веществ. Чем дальше, тем хуже это сказывается на ВСЕХ системах органов.
Лучше использовать тестовые полоски на сахар и кетоны. Например, Diaphan или Кетоглюк-1. Делаете анализ. Достаточно пары капель, там маленькие поля для нанесения мочи. Пометила крыса или написала — прямо в эту лужу и макните полоску, лишнюю мочу слегка стряхните. Через 1 минуту сравниваете цвет поля со шкалой на пенале.
Если показывает глюкозу (и кетоны), колоть физраствор и фуросемид. Физраствор — по 3 мл + 0,05 мл фуросемида — в один шприц (или в разные, тогда разнести на 10 минут). Если через 3 часа тест-анализ опять показывает наличие сахара, вам нужен инсулин. Тут терять уже нечего. Инсулин может крысе помочь, а если поможет, то крыса на инсулине — это лучше, чем совсем без крысы.

Используемые инсулины:
— хумулин регуляр (чел.) — инсулин короткого действия. Если что-то пойдет не так, то он быстро выведется из организма.
— лантус (чел.) — инсулин продленного действия БЕЗ пика действия.
— канинсулин (вет.) – инсулин среднего действия.

Первичная дозировка лантуса/хумулина на крысу 500 г 1/4 от 0,25 ИЕ. То есть набираете 2 ИЕ чистого инсулина, добираете до 1 мл физраствором, ставите из этого коктейля 3-4 ИЕ. На следующий раз дозу постепенно повышаете. Разводите инсулин таким же образом, но ставите уже 6 ИЕ из этого.
Хумулин колоть надо будет до 4-5 раз в сутки, в зависимости от состояния. Лантус или Канинсулин 1-2 раза в сутки, его хватать может и на 20 ч, и на 18.
И дозировки, и период действия инсулина для каждой крысы индивидуален и определяется опытным путем.

После введения инсулина наблюдаете. Проверяете лапы, хвост, смотрите на поведение, не становится ли вялой, сонной. Если что, тормошите, берете в руки, проверяете реакцию мышц, силу сопротивляемости крысы. Через час и далее пару раз берете анализ мочи снова. Главное сейчас — убрать кетоны, если были. Глюкоза снизится, но полоска может и не показать, если изначально зашкаливало.
Первые признаки гипогликемии у крысы: повышение температуры хвоста, лап; вялость, сонливость, постепенная потеря сознания.
То есть в течение минимум часа после введения инсулина наблюдать! Гипогликемия будет видна, как правило, уже в течение первых 15-20 минут, но осторожность не помешает. Иногда это может произойти и через 4-6 часов (в районе пика действия инсулина). С легкой гипогликемией организм справляется самостоятельно, если вовремя подсунуть чего-то сладкого (банан, мёд, зефир и т.п.) и обязательно доступ к воде.
Гипогликемия в серьезной стадии бывает только при сильной передозировке инсулина, тогда это потеря сознания, судороги. Если не принять меры, может наступить кома и смерть. Под рукой обязательно иметь раствор глюкозы, физраствор, фуросемид (лазикс).
Дозировки на крысу грамм 450-500.
В один шприц глюкоза 0,1 мл на 100 грамм, физраствор 1,5-2 кубика и 2 ИЕ фуросемида. Все это вводится под шкуру(холка, бока, попа). В такие моменты животное ничего не чувствует. Надо действовать решительно и не бояться, что крысе может быть больно. Дальше дать покой и ждать. Всё, что можно было сделать, сделали.
В тяжелых случаях, когда дошло до судорог, колют под холку отдельным уколом мексидол 0,5 мл (для защиты мозга). Далее курсом 5 дней, два раза по 0,5 мл.
Примерно через 12 часов после кризиса наступает время очередного укола. Тут надо постараться понять, чего нам надо дальше колоть — инсулин или глюкозу. Тут понадобится глюкометр. Берется кровь на сахар. Если сахар больше 9, то колем инсулин, если меньше 4 — глюкозу. После критических ситуаций обычно дозу снижают на половину ИЕ и продолжают уже с меньшей дозировкой.

Только не надо думать, что с помощью инсулина нормализуются функции внутренних органов, скорее наоборот — приходит конец поджелудочной железе.

Фоспренил снижает сахар (и при диабете 1-го типа, и 2-го ). Нужно поить по 0,5 мл 2р/день.

Диета при диабете
(варианты, описанные разными крысоводами, поэтому в чем-то противоречат друг другу)

1. Самодельная зерновая смесь и много свежего, чтобы сделать в рационе «перекос» с углеводов на растительные белки/жиры. Овощи можно любые, кроме картофеля и кукурузы. Можно сырые, можно тушеные. Топинамбур — ооочень хорошая вещь для диабетика! Из фруктов яблоки любые. Остальные фрукты и ягоды постепенно добавлять, отслеживая реакцию. Можно яйцо вареное, можно мяса кусочек. Почему рекомендуется именно зерновая смесь — чтобы исключить массу нехороших вещей, которые содержатся в промышленных сухих кормах.
2. Из мяса — только нежирную, отваренную без соли курицу. Из фруктов — только несладкие яблоки. Из овощей все, кроме содержащих крахмал (картофель, кукуруза, горошек и т.д.). Кукуруза крайне резко поднимает сахар. Из кормов необходимо вручную выбирать изюм, кукурузу и сушеные фрукты (бананы, цукаты). Гречку отварную давать в очень маленьких количествах. Так же как и молочные продукты — только как лакомство и очень редко.
Можно утром давать крыске салат из четвертинки вареного яичка, мелко нарезанного с огурцами, капустой или салатом ( примерно 1 столовая ложка) и сухой корм без добавок. Вечером такую же порцию того и другого (раза три в неделю).
3. Утреннее и вечернее основное кормление (сырые овощи 3-4 видов, иногда банан/яблоко, чередуются отварная гречка/нежирный домашний творог/отварной коричневый рис/самодельное пюре из тушеных овощей/вареное куриное яйцо),
2-3 перекуса (немного овощей).
В свободном доступе сухой корм: 60% смесь из кукурузных, гороховых, бобовых, овсяных, ячменных хлопьев, 10% сухая гречка, 10% сухой корм для кошек-диабетиков, 10% крекеры из цельного коричневого риса, 10% сухие макароны из цельной непросеянной пшеницы.
Пищевые добавки — инулин и Dialevel (корица, цинк, ALA кислоты), обычный витаминный комплекс.
4. Запаренная гречка.
5. Вместо воды наливать крыске отвары для диабетиков.
6. Брокколи и цветная капуста — доказано, что из овощей достоверно улучшают усвоение инсулина только они.

Внимание! Если после применения отваров и диеты крыска все равно будет пить более чем 30 мл в сутки — необходимо начинать колоть инсулин. Иначе можно посадить почки.

Привести показатели сахара в норму при диабете 2-го типа или разовом скачке помогают:
— растения, улучшающие приток крови к головному мозгу (первоцвет, хвощ, арника, каштан). Они уменьшают дефицит глюкозы в мозговой ткани и, соответственно, снижают уровень сахара;
— травы, улучшающие функцию поджелудочной железы (увеличивающие выработку инсулина), — сбор «Арфазетин», побеги черники, створки фасоли и гороха, корень одуванчика, корень цикория, плоды шелковицы.

При любом типе диабета показано разумное увеличение физической нагрузки. Можно спланировать обстановку в клетке, чтобы максимально увеличить пути перемещения с полки на полку, из одного гамака в другой. Можно разместить кормушку и поилку в разных концах клетки и т.д.

Последний раз редактировалось Iris-Ka 12 дек 2012 14:07, всего редактировалось 1 раз.

Источник

Признаки сахарного диабета у крыс

Несмотря на значительное развитие современной диабетологии, проблема профилактики, ранней диагностики, контроля за течением сахарного диабета (СД) у детей и взрослых стала острейшей медико-социальной проблемой, которая в большинстве стран мира обозначена в числе приоритетных направлений развития здравоохранения. Приводя к тяжелым осложнениям и ранней потере трудоспособности, СД характеризуется высокой смертностью, в том числе в молодом возрасте [1]. Клеточная терапия позволяет в полном объеме обеспечить доставку в организм необходимых пептидов и факторов межклеточного взаимодействия, которые способствуют репаративной регенерации ткани поджелудочной железы, приводя таким образом к компенсации инсулиновой недостаточности [2,4]. Современные методы лечения СД не позволяют добиться нормального уровня глюкозы в крови без эпизодов гипо- и гипергликемии и полностью предотвратить развитие осложнений СД. Замещение β-клеток (пересадка поджелудочной железы или β-клеток) сопровождается осложнениями, требует пожизненной иммуносупрессивной терапии, при этом далеко не всегда достигается инсулинонезависимость, а также имеется существенный дефицит доноров. Одним из инновационных методов лечения является применение стволовых клеток (СК), которые лишены этих недостатков. Аллогенные трансплантации СК осложнены иммунным отторжением трансплантата, а использование эмбриональных СК — этическими аспектами, сложностью отбора клеточных линий и риском возникновения тератом [3]. На сегодняшний день одним из наиболее перспективных маркёров клеток-предшественниц эндокриноцитов поджелудочной железы является рецептор фактора стволовых клеток C-kit или CD117, который участвует в дифференцировке этих клеток в эндокриноциты в пренатальном развитии и сохраняется у взрослого человека в клетках островков поджелудочной железы. Однако до сих пор остаётся неизученным участие C-kit+-клеток-предшественниц в восстановлении популяции клеток островков Лангерганса при сахарном диабете I типа [5]. Новый взгляд на проблему регенерацию ткани ПЖ, которая до недавнего времени считалась органом, который абсолютно не восстанавливает эндокринную часть, и пути стимуляции репаративной регенерации открывают новые возможные пути лечения и профилактики развития СД.

Цель — исследовать патофизиологические изменения в организме крыс при аллоксановом диабете и эффективность их коррекции трансплантацией культуры клеток поджелудочной железы.

Материал и методы. Экспериментальное исследование выполнено на 60 крысах самцах массой 200-250 г. Животные были разделены на 3 группы по 20 крыс в каждой: 1 — контрольная группа; 2 — животные с аллоксановым диабетом; 3 — животные с аллоксановым диабетом, которым выполняли трансплантацию культур клеток поджелудочной железы кролика. Сахарный диабет вызывали путем подкожного введения раствора аллоксанатетрагидрата из расчета 20 мг на 100 г массы тела, предварительно 2 суток голодавшим животным. Раствор аллоксана готовили путем разведения кристаллического субстрата AlloxanTetrahydrate фирмы Fluka-Sigma (Германия) в стерильной дистиллированной воде. После растворения кристаллов вещества, стерильность раствора осуществляли путем пропускания его через мембрану Millex-GV с фильтром 0,22 mm фирмы MILLIPORE (Франция) и помещали в стерильные закатанные флаконы.

Материалом для приготовления культуры клеток поджелудочной железы служила поджелудочная железа (ПЖ) 3 месячного кролика породы Шиншилла. В стерильных условиях экспериментального операционного блока под внутримышечным наркозом Ketamine+Xylazine в пропорции 40+7,5 мг/кг выполняли верхнесрединную лапаротомию, мобилизовали поджелудочную железу кролика, пунктировали ее главный проток, в который вводили 0,25 % раствор трипсина. После чего ПЖ немедленно извлекали из организма животного и помещали в стерильный раствор среды S 199 с антибиотиком и передавали для дальнейшей обработки в лабораторию клеточного и тканевого культивирования ИНВХ АМН Украины. В лаборатории предварительно трипсинизированную поджелудочную железу механически делят на фрагменты размером 1мм 3 и подвергают тепловой трипсинизации при температуре 37 0 С — 5 минут в 0,25% растворе трипсина (Институт полиомиелита и вирусных энцефалитов, г. Москва). Действие трипсина останавливают добавлением 5 % сыворотки крупного рогатого скота «Биолот» (г.Санкт-Петербург). Полученную ферментативно-дезагрегированную клеточную суспензию центрифугируют при 800 об/мин, в течение 6 минут. Супернатант сливают, а в клеточный осадок добавляют питательную среду Игла (Институт полиомиелита и вирусных энцефалитов, г.Москва). Жизнеспособность клеток определяют в камере Горяева, предварительно окрашивая трипановым синим. Концентрация клеток в 1 мл суспензии составляет при этом 2,5 млн/мл. Трансплантацию культуры эндокринных клеток ПЖ производили крысам в переднюю брюшную стенку, толстой иглой в верхний квадрат живота из расчета 12000-15000 клеток на 1 крысу.

Содержание глюкозы, холестерина и триглицеридов определяли при помощи программируемого фотометра EppendorfEpac 6140, используя соответствующие наборы реактивов производства «Диакон ДС» (Россия), «Diasys» (Германия), «LaChema» (Чехия). Соотношение фракций липопротеидов определяли электрофотометрическим методом с применением системы для электрофореза «Helena» (Франция), в качестве носителя использовались пленки из ацетата целлюлозы. Концентрацию глюкозы определяли глюкозоксидазным методом. Содержание холестерина исследовали ферментативным методом с холестеролоксидазой и пероксидазой. Определение концентрации триглицеридов проводилось ферментативным методом с глицерокиназой и глицерол-3-фосфатоксидазой.

Определение содержания инсулина, кортикостерона, С-пептида, тироксина и трийодтиронина проводили радиоиммунологическим методом с использованием стандартных коммерческих наборов реактивов фирмы «Immunotech» (Чехия). Уровень инсулина и С-пептида определяли через 4-6 часов после трансплантации клеток, а также через 1,7 сутки, 1 и 3 месяц.

В опыт брали животных со средней тяжестью сахарного диабета (условно выделяли 3 степени тяжести течения сахарного диабета: легкая — концентрация глюкоза крови была в пределах 10 ммоль/л, средняя — 10-15 ммоль/л, тяжелая — 15 и более).

Гистологическое исследование органов (ПЖ, сердца, почек, сосудов) проводили на 6, 10, 14 и 30 сутки после трансплантации эндокриноцитов ПЖ. Органы фиксировались в 10 % нейтральном формалине и затем заливались парафином. Гистологические срезы окрашивались гематоксилином и эозином, по Вергоффу, альциановым синим при рН 1,0 и 2,6, выполняли ШИК-реакцию.

Исследование окрашенных препаратов и морфометрическое исследование проводили с помощью исследовательского микроскопа OlympusAX70 (Япония) и соединенной с ним компьютерной системы с программой анализа изображения AnalySIS 3.1 (Германия).

Статистическую обработку полученных данных выполняли на компьютере PentiumIII с помощью программ «MicrosoftExcel 10.0», «Statistica 6.0» (USA).

Результаты исследований. После введения диабетогенной дозы аллоксанатетрагидрата наблюдалось несколько фаз изменений содержания глюкозы крови: первая фаза — гипергликемическая, достигающая максимума в течение первых 2-4 часов; вторая — гипогликемическая, которая в основном проявлялась на протяжении 15-24 часов, и наконец третья фаза — фаза стойкой гипергликемии (свыше 24 часов).

Первые признаки диабета проявлялись в виде резкого увеличения суточного потребления воды (более 120 мл), полифагией, полиурией, гипергликемией, резкой потери в весе, выпадении волосяного покрова. В разные сроки эксперимента развивались трофические язвы голени, гангрена с самоампутацией хвоста. Около 15 % животных погибло в результате гипергликемической или гипогликемической комы в разные сроки развития аллоксанового диабета.

Известно, что инсулиновая недостаточность при аллоксановом диабете приводит к усиленному распаду тканевых белков, повышенному поступлению в кровь аминокислот, увеличению общего азота крови. Характерным нарушением липидного обмена является повышение содержания в сыворотке липопротеидов низкой плотности (ЛПНП) до 41,7 % (в норме до 19,9 %), триглицеридов до 1,03 ммоль/л (в норме до 0,47 ммоль/л), при р

Источник