Смд лаборатория анализ клеща

Серологическая диагностика боррелиоза (кровь + спинномозговая жидкость)

Биоматериал

Для данного исследования лаборатория принимает следующий биоматериал:

• Спинномозговая жидкость
• Кровь (сыворотка)

Подготовка к исследованию

Кровь: Не менее 3 часов после последнего приема пищи. Можно пить воду без газа.

Спинномозговая жидкость (СМЖ): Условия подготовки определяются лечащим врачом.

Лайм-боррелиоз (ЛБ), болезнь Лайма или иксодовый клещевой боррелиоз (ИКБ) – трансмиссивное полисистемное заболевание, приводящее к поражению опорно-двигательного аппарата, нервной и сердечно-сосудистой систем, кожи, занимающее по широте распространения и уровню заболеваемости одно из ведущих мест среди природно-очаговых заболеваний. Заболевание регистрируется на значительной территории Российской Федерации.

Возбудители ЛБ – боррелии комплекса Borrelia burgdorferi sensu lato, переносчики – иксодовые клещи. В диагностике ЛБ необходимо учитывать эпидемиологический анамнез (посещение леса, присасывание клеща) и клинические проявления, главным из которых, является мигрирующая эритема на ранних стадиях заболевания. Однако до 50% случаев ЛБ могут протекать со стертыми клиническими признаками, в частности, в безэритемной форме, что осложняет постановку диагноза. Использование в клинической практике современных высокочувствительных и специфичных методов серологической диагностики ЛБ позволяет своевременно выявить ранний боррелиоз и начать курс лечения, сократить риск развития тяжелых хронических форм болезни Лайма, а также провести дифференциальную диагностику боррелиоза от других инфекций, передающихся иксодовыми клещами.

Серологическая диагностика клещевого боррелиоза (300049, 300051) – это уникальные исследования, выполняемые с помощью диагностической тест-системы в формате иммуночипа, разработанной в ФБУН ЦНИИ эпидемиологии Роспотребнадзора!

Иммуночип повышает эффективность проведения серологического анализа ЛБ и информативность результата, т.к. позволяет одновременно определять в исследуемом образце антитела к 8 группам диагностически значимых антигенов боррелий видов Borrelia afzelii и Borrelia garinii, наиболее распространенных в РФ, и одновременно дифференцировать их по классам: IgM и IgG. Показано, что использование комбинации из нескольких рекомбинантных белков разных видов боррелий позволяет повысить чувствительность и специфичность теста. Иммуночип – высокочувствителен и специфичен (сравнительная оценка проводилась с коммерческими тест-системами в формате ИФА и иммунного блоттинга, зарегистрированными на территории РФ), исключает субъективность оценки благодаря автоматизированной интерпретации результатов.

На I (острой, первые три месяца) стадии заболевания антитела IgM и IgG обнаруживаются у 50-70% пациентов; уровень антител IgM достигает пика в первые 3-6 недель заболевания, пик синтеза антител IgG приходится на 6–8-ю неделю после начала инфекции. На ранней стадии острой формы заболевания с целью установления сероконверсии важно исследовать парные сыворотки, полученные от пациентов с интервалом в 20–30 дней. На II (подострой, длящейся 3-6 месяцев) стадии заболевания в зависимости от сроков развития диссеминации и органной патологии антитела IgM обнаруживаются у 30-80% пациентов, антитела IgG – у 65-100%. ВАЖНО: наличие антител IgМ к антигенам боррелий в сыворотке крови больных Лайм-боррелиозом, как правило, указывает на раннюю стадию инфекции. В некоторых случаях антитела IgM могут выявляться в течение 1–2 лет и более. На III (хронической, длящейся более 6 месяцев) стадии заболевания антитела IgM выявляются у 5-50 % больных, антитела IgG – практически в 100% случаев. ВАЖНО: специфические иммуноглобулины класса G могут детектироваться в течение длительного периода времени (несколько лет). Долго они сохраняются также и после успешно проведенной антибиотикотерапии.

Для подтверждения диагноза рекомендуется использовать двухшаговую схему лабораторной диагностики: определение специфических антител методом ИФА, при положительном результате — подтверждение их специфичности методом иммунного блоттинга или иммуночипа.

Список антигенов, к которым определяется наличие антител в иммуночипе: p100 В.garinii, p100 B.afzelii, VlsE B.garinii, VlsE B.afzelii, p39 B.afzelii, p41 B.garinii, p41 B.afzelii, p58 B.afzelii, BBK32 B.garinii, BBK32 B.afzelii, OspC B.garinii, OspC B.afzelii, p17 B.garinii, p17 B.afzelii.

Показания к исследованию:

• Диагностика иксодового клещевого боррелиоза (болезни Лайма).

Критерии результата при тестировании IgM антител

Отрицательный	Положительный	Неопределенный
Не выявлено антител ни к одному из антигенов. Выявлены антитела только к антигену p100	Выявлены антитела к белку OspC Выявлены антитела как минимум к двум антигенам из группы: p41, VlsE, p17	Выявлены антитела только к одному антигену из группы: p41, VlsE, p17, независимо от обнаружения антител к антигенам p58, p39, BBK32

Критерии результата при тестировании IgG антител

Отрицательный	Положительный	Неопределенный
Не выявлено антител ни к одному из антигенов. Выявлены антитела только к антигену p17	Выявлены антитела к белку VlsE Выявлены антитела как минимум к двум антигенам из группы: p100, p58, p41, p39, BBK32, OspC, p17	Выявлены антитела только к одному антигену из группы: p100, p58, p41, p39, BBK32, OspC

Комплекс антител, выявляемый на разных стадиях ЛБ

Стадия заболевания	IgM антитела	IgG антитела
Острая (I)	OspC, p41, p17, VlsE	P41, BBK32, p17, OspC, VlsE
Подострая (II)	OspC, p41, p17, BBK32, VlsE	p17, p41, VlsE, OspC, BBK32, p58
Хроническая (III)	OspC, p41, VlsE, P39, p58	p17, BBK32, p41, p58, VlsE, p100, OspC, p39

• При наличии признаков поражения центральной нервной системы рекомендуется проводить анализ специфических антител в спинномозговой жидкости (интратекальный синтез антител), так как отрицательный результат анализа сыворотки крови у больного нейроборрелиозом не свидетельствует об отсутствии у него инфекции. Исследование спинномозговой жидкости (СМЖ) обязательно проводится одновременно с исследованием сыворотки крови.
• Отрицательный результат серологических тестов на ранних стадиях заболевания не является доказательством отсутствия инфекции.
• В исследовании 300051 (кровь + спинномозговая жидкость) отдельно описываются антигены для каждого вида биоматериала.

Источник

d2, Клещ домашней пыли (Dermatophagoides farinae), Ig E, ImmunoCAP® (Phadia AB)

Биоматериал

Для данного исследования лаборатория принимает следующий биоматериал:

Подготовка к исследованию

Не менее 3 часов после последнего приема пищи. Можно пить воду без газа.

Метод исследования

• Технология ImmunoCAP. Флюороэнзимоиммунологический анализ

Специфический иммуноглобулин класса Е (sIg E) – основной лабораторный маркер гиперчувствительности немедленного типа (I тип аллергической реакции). Обнаружение в сыворотке крови Ig E к клещу домашней пыли свидетельствует о сенсибилизации пациента к этому аллергену.

Клещи домашней пыли (house dust mites) – главная причина аллергической сенсибилизации и аллергических заболеваний во всем мире. Это мельчайшие членистоногие, которые питаются частицами слущенного эпителия человека. Источники аллергенов – тело и фекалии клещей. Обитают, в основном, в жилых помещениях, в большом количестве обнаруживаются в старых, ветхих домах. Вместе с пылью накапливаются в домашнем текстиле, постельных принадлежностях, мягких игрушках, коврах, мебели. Клещами домашней пыли могут быть заражены продукты, например, мука, крупы.

Аллергены клещей могут поступать в организм разными путями: при вдыхании, при проглатывании, а также при непосредственном контакте с кожей. У сенсибилизированных пациентов вдыхание аллергенов клещей домашней пыли приводит к появлению симптомов ринита (насморк, чихание, отек и раздражение слизистой оболочки носа), конъюнктивита (слезотечение, покраснение и зуд глаз) и астмы (затрудненное дыхание, кашель). Проявления у пациента многократно усиливаются во время проведения уборки, перетряхивании постельных принадлежностей, после ночного сна. При употреблении пищи, загрязненной продуктами жизнедеятельности клещей, возможно появление симптомов крапивницы; описаны случаи развития тяжелых системных реакций по типу анафилаксии.

На молекулярном уровне охарактеризовано около 40 аллергокомпонентов клеща Dermatophagoides farinae (Der f). Высокая перекрестная реактивность наблюдается с гомологичными белками других видов клещей домашней пыли, особенно Dermatophagoides pteronyssinus.

Тропомиозин (Der f10) -актин-связывающий белок, присутствующий в мышечных волокнах ракообразных (креветки), клещей, гельминтов, определяет формирование перекрёстной сенсибилизации к этим видам беспозвоночных.

Показания к исследованию:

• определение сенсибилизации к клещу домашней пыли D. farinae.

Референсные значения: 100.00 — class 6, очень высокая концентрация антител.

Источник

Клещевой энцефалит

Клещевой энцефалит – трансмиссивное вирусное заболевание с выраженной сезонностью, зависящей от периода активности иксодовых клещей, и природной очаговостью. Возбудитель – вирус клещевого энцефалита, относящийся к РНК-вирусам рода Flavivirus. В России клещевой энцефалит регистрируется в 46 субъектах, около 70% всех случаев заболевания приходится на Урал и Сибирь. Кроме того, вирус клещевого энцефалита широко распространен в Европе: прибалтийских странах, Чехии, Словакии, Австрии, Германии, Швеции, Норвегии и Финляндии, а также встречается в Казахстане, Монголии, Китае и Японии.

В течение эпидемического сезона в РФ ежегодно регистрируется около 3000 случаев заболевания, средняя летальность при клещевом энцефалите составляет 1,2%. Наиболее тяжелые его формы и летальность около 10% связаны с дальневосточным генотипом вируса, циркулирующем преимущественно на Дальнем Востоке.

Как и многие другие арбовирусные инфекции в 80–90% случаев клещевой энцефалит протекает в инаппарантной форме, в остальных случаях развиваются различные по степени тяжести варианты течения заболевания: лихорадка, вирусные менингит и энцефалит. Также выделяют полиомиелитическую форму заболевания. При неблагоприятном сценарии острая стадия инфекции переходит в прогредиентную (хроническую) форму. В большинстве случаев после очаговой энцефалитической формы развиваются стойкие нарушения деятельности ЦНС.

Показания к обследованию. Лихорадка, головная боль, боль в области мышц шеи и плечевого пояса, тошнота, рвота, гиперемия лица, шеи и верхней части туловища, возможные потеря сознания, бред, психомоторное возбуждение и судорожный приступ при наличии эпидемиологического анамнеза: присасывание клеща, посещение лесной зоны, употребление в пищу сырого козьего молока.

• Другие иксодовые клещевые инфекции.
• При хронической форме – заболевания ЦНС неинфекционной этиологии.

Материал для исследований

• Сыворотка крови – выявление специфических АТ, изоляция вируса в культуре клеток;
• плазма крови – выявление РНК вируса;
• СМЖ – выявление РНК вируса, изоляция вируса в культуре клеток;
• цельная кровь – изоляция вируса в культуре клеток.

Этиологическая лабораторная диагностика включает изоляцию вируса с использованием культуральных методов, обнаружение РНК вируса и его АГ, обнаружение специфических АТ к возбудителю.

Сравнительная характеристика методов лабораторной диагностики. Культуральный метод, основанный на изоляции вируса из цельной крови, сыворотки крови, тканей мозга в культуре клеток (СПЭВ, Vero, клещевых клеточных культурах) и с использованием чувствительных лабораторных животных не применяется как рутинный метод в диагностических лабораториях, т. к. требует соблюдения мер биологической безопасности при работе, связанной с накоплением вируса, относящегося ко II группе патогенности.

Обнаружение АГ вируса в анализе на клещевой энцефалит методом ИФА в крови, взятой в инкубационный период, в случае отсутствия переносчика, позволяет провести адекватную профилактику клещевого энцефалита. В период острых клинических проявлений динамическое определение АГ в крови позволяет сделать прогноз о возможном переходе заболевания в хроническую форму, и в случае прогредиентного течения заболевания – дифференцировать клещевой энцефалит от заболеваний нервной системы другой этиологии.

Выявление РНК вируса методом ПЦР обладает высокой диагностической специфичностью, но недостаточной чувствительностью, которая не превышает 50% (относительно обнаружения специфических АТ методом ИФА); исследование проводят только в комплексе с выявлением специфических АТ. Для обнаружения РНК вируса используют пробы крови или СМЖ, взятые в первую неделю острой стадии заболевания или в случае уточнения развития персистенции вируса клещевого энцефалита, при расшифровке летальных исходов исследуют ткани мозга.

Определение специфических АТ IgM и IgG в сыворотке крови и/или в СМЖ выполняют преимущественно методом ИФА. Также для изучения в динамике титров нарастания гемагглютинирующих АТ в остром периоде заболевания используют метод РТГА. АТ IgM к вирусу клещевого энцефалита появляются с 3–4-го дня от начала заболевания, АТ IgG – в среднем на 10–14-й дни. Определенные сложности при лабораторном подтверждении диагноза, основанном на выявлении специфических АТ IgM и динамическом изменении титра АТ IgG в «парных сыворотках», возникают в случае заболевания вакцинированных лиц. Как правило, при этом можно наблюдать в основном нарастание АТ IgG. В этом случае целесообразно использовать методы прямого обнаружения возбудителя: изоляция вируса, обнаружение РНК вируса или его АГ.

Реакция нейтрализации (РН) является наиболее специфичной реакцией для обнаружения АТ. Ограничением для использования этого метода является необходимость работы с живым вирусом и соблюдения соответственных мер биологической безопасности.

Особенности интерпретации результатов лабораторных исследований. Обнаружение РНК вируса клещевого энцефалита в крови и СМЖ пациента является основанием для предварительной постановки диагноза, выявление нарастания титров АТ к вирусу клещевого энцефалита в образцах крови, взятых в динамике (парные сыворотки), служит подтверждением этиологии заболевания.

Источник

ДНК/РНК Borrelia burgdorferi sl — возбудитель иксодовых клещевых боррелиозов (ИКБ), качественное определение

Биоматериал

Для данного исследования лаборатория принимает следующий биоматериал:

Подготовка к исследованию

Присосавшегося клеща необходимо как можно быстрее удалить. Для этого рекомендуется применить метод с нитью или специальные устройства («клещ-отвертку» или «клещевую ручку лассо»). Желательно сохранить клеща для проведения исследования в максимально неповрежденном состоянии.

Клеща (живого или мёртвого, снятого с человека) поместить в прозрачную ёмкость (контейнер пластиковый универсальный, сухую пробирку, пенициллиновый флакон, баночку из-под детского питания и т.д.). Клещей (не более 3 особей), снятых с одного человека, допускается помещать в одну тару и оформлять как одно исследование. Недопустимо помещать клещей, снятых с нескольких человек, в одну тару и оформлять как одно исследование.

Поместить тару с клещом в Zip-пакетик, тщательно закрыть пакетик на застежку, завернуть край несколько раз и прошить с помощью степлера или тщательно заклеить скотчем.

Внимание: подготовка пациента не требуется!

Метод исследования

Исследование позволяет экстренно провести диагностику наличия опасных возбудителей иксодовых клещевых боррелиозов в клеще и при получении положительного результата обратиться к врачу-инфекционисту.

Иксодовые клещевые боррелиозы вызывают бактерии комплекса B.burgdorferi sensu lato. Инкубационный период длится от 1 до 40 дней, в среднем 10-14 дней. В начальный период у большинства больных на месте присасывания клеща развивается мигрирующая эритема – это область покраснения кожи диаметром не менее 5 см, с медленным центробежным ростом, чаще – кольцевидного типа с просветлением в центре. В центре элемента – отчетливый след от укуса. Локализация – подмышки, пах, под грудью, подколенная ямка или на границе открытых участков с одеждой (голеностопные суставы, локти, кисти). Минимальные субъективные ощущения в области кожной эритемы – жжение, зуд. Температура тела при этом, как правило, нормальная или субфебрильная (37,2 — 37,5 о С). Наряду с температурной реакцией отмечается быстрая утомляемость, слабость, головная боль, миалгии. Мигрирующая эритема – основной признак иксодовых клещевых боррелиозов. В некоторых случаях в начале боррелиоза эритема отсутствует. При этом более ярко выражен общеинфекционный синдром: повышение температуры до 38-39 о С, озноб, головные боли, тошнота, рвота, мышечные боли в области шеи, спины, конечностей. В течение заболевания может возникнуть поражение нервной системы, суставов, оболочек сердца, глаз. При переходе в хроническую форму инфекции у больных могут развиться артриты, нейроборрелиоз, хронический атрофический акродерматит.

Также возможно комплексное исследование клеща на инфекции (вирусный клещевой энцефалит, иксодовый клещевой боррелиоз, Borrelia miyamotoi боррелиоз, гранулоцитарный анаплазмоз человека, моноцитарный эрлихиоз человека, риккетсиозы группы пятнистых лихорадок) – услуга 170400.

Показания к исследованию:

• Исследование клеща в случае присасывания с целью принятия мер экстренной профилактики
• Эпидемиологические исследования

Интерпретация результатов:

Пример результата (вариант нормы):

Параметр	Результат	Референсные значения
ДНК/РНК Borrelia burgdorferi sl (ИКБ), качественное определение	Не обнаружено	Не обнаружено

В случае отрицательного результата и наличия факта присасывания внимательно наблюдать за возможными клиническими признаками проявления заболеваний, передающихся иксодовыми клещами. При появлении клинических симптомов обратиться к врачу-инфекционисту.

Результат «ОБНАРУЖЕНО» означает, что в клеще присутствуют боррелии комплекса Borrelia burgdorferi sl.

Рекомендуется обратиться к врачу-инфекционисту для проведения специфической антибиотикопрофилактики.

Источник